Реферат: Легко- и трудногидролизуемые полисахариды
Из полученного раствора отбирают пипеткой 50 см3
в мерную колбу на 100 см3 и осторожно при постоянном перемешивании
нейтрализуют 20% -ным раствором NaOH по метиловому
оранжевому. Объем раствора доводят до метки дистиллированной водой. В
нейтрализованном растворе определяют концентрацию PB.
Массовую долю трудногидролизуемых полисахаридов, % к
абсолютно сухой древесине, рассчитывают по формуле
 "
где ст - массовая доля PB
в разбавленном нейтрализованном гидролизате, %; V - общий
объем кислого гидролизата, V= = 1000 см3; з - разбавление гидролизата при нейтрализации, л= 100/50 = 2; kT - коэффициент пересчета моносахаридов в
полисахариды, равный 0,90; g - масса абсолютно сухой
навески древесины, г.
Коэффициент пересчета берут равным 0,90, поскольку основным
сахаром в гидролизате трудногидролизуемых полисахаридов является глюкоза.
Для получения реактива Фелинга готовят два раствора А - 69,3
г CuSO4 5Н20 в 1 дм3
водного раствора; Б - 346 г сегнетовой соли и 100 г NaOH в 1 дм3 водного раствора.
Методика анализа. В коническую колбу вместимостью 250 см3
вливают пипеткой 10 см3 раствора А, затем 10 см3 раствора
Б и 20 см3 гидролизата легкогидролизуемых полисахаридов или
нейтрализованного гидролизата трудногидролизуемых полисахаридов. Смесь
разбавляют дистиллированной водой до общего объема 50 см3 и хорошо
перемешивают. Ставят колбу на горячую включенную электроплитку, нагревают смесь
до кипения в течение 3 мин и кипятят точно 2 мин, считая с момента появления
первого пузырька на поверхности раствора.
Под колбу рекомендуется подложить асбестовую пластинку с
круглым вырезом диаметром около 6 см. Кипение должно быть умеренным, чтобы
объем жидкости в колбе оставался примерно постоянным. Для уменьшения испарения
в горло колбы вставляют маленькую конусообразную стеклянную воронку.
При недостатке реактива Фелинга, о чем свидетельствует
исчезновение синей окраски раствора после кипячения, объем пробы гидролизата
уменьшают, добавив при разбавлении соответствующий объем воды. По окончании
кипячения колбу быстро охлаждают холодной водой до 25°С, добавляют раствор KI и 10 см3 25% -ной H2SO4 и сразу
же при непрерывном перемешивании титруют выделившийся иод раствором тиосульфата
натрия концентрацией 0,1 моль/дм3 до перехода коричневой окраски в
светло-желтую.
Затем добавляют 10 см3 0.5...1% -ного раствора
крахмала и медленно дотитровывают раствор до полного исчезновения синей окраски.
Раствор остается окрашенным в кремовый цвет вследствие
образования иодида меди. В аналогичных условиях, но без добавления раствора
сахара, проводят контрольный опыт. По разности расходов раствора Na2S2O3 в контрольном и рабочем опытах, а, см3,
с помощью эмпирической таблицы находят количество сахара в пробе гидролизата,
взятой на анализ, Ь, мг.
При анализе трудногидролизуемых полисахаридов расчет ведут
на глюкозу, а при анализе гидролизата легкогидролизуемых полисахаридов - на
ксилозу и маннозу. Затем рассчитывают массовую долю PB
в гидролизате сл или ст,%, по формуле
где b - количество сахара в пробе
гидролизата объемом у, см1, найденное по таблице, мг.
Проводят титрование медно-щелочного раствора с известным
титром исследуемым раствором сахара без доступа воздуха в токе водяного пара. Титр
медно-щелочного раствора устанавливают по глюкозе. Прибор для титрования состоит
из внешнего сосуда - конической колбы / и внутреннего сосуда - эбулиостата 1 с
впаянной в его боковую стенку трубкой, доходящей почти до дна сосуда. Суженный
конец эбулиостата вставлен в колбу / на резиновой пробке и имеет отверстие для
выхода пара 3. В резиновую пробку вставлена стеклянная трубка 4 для отвода
избытка пара из колбы /. Струю пара регулируют винтовым зажимом на резиновой
трубке, надетой на конец стеклянной трубки. Во время титрования верхний конец
эбулиостата закрывают резиновой пробкой, в которую вставлен конец бюретки 5 для
раствора сахара. Реагирующая жидкость в эбулиостате обогревается паровой
рубашкой и пропусканием пара через жидкость.
Индикатором при титровании служит метиленовый голубой,
который в окислительной среде имеет синий цвет, а в восстановительной бесцветен.
Для предотвращения выпадения осадка оксида меди в медно-щелочной раствор
добавляют желтую кровяную соль калия, которая образует с Cu2O растворимое
комплексное соединение.
Для проведения анализа приготовляют два раствора: А - 10 г CuSO4 ·5З20 и 0,04
г метиленового голубого растворяют в воде в мерной колбе на 1 дм3
доведением до метки; Б - 50 г сегнетовой соли растворяют в воде, отдельно
растворяют в воде 4 г желтой кровяной соли, переносят оба раствора в мерную
колбу на 1 дм \ добавляют 75 г NaOH в виде 50% -ного
водного раствора и доводят водой до метки.
Прибор для определения PB
эбулиостатическим методом и дозаторы растворов. Дозатор для отмеривания
раствора А представляет собой два сообщающихся сосуда. Сосуд вместимостью около
100 см3 служит для хранения раствора А и сосуд-пипетка для его
отмеривания. На верхнем и нижнем отводах сосуда-пипетки нанесены метки,
соответствующие объему 5 cmj. Для отмеривания раствора А открывают
кран / и заполняют сосуд-пипетку до верхней метки. Затем кран закрывают. При
отмеривании раствора А и заливании его в эбулиостат открывают кран 2 и спускают
раствор до нижней метки. Второй дозатор для отмеривания раствора Б представляет
собой пипетку вместимостью 5 см, к верхнему концу которой припаян трехходовой
кран. На верхний отвод тройника надета резиновая груша. Раствор Б хранят в
колбе вместимостью 100 см', откуда набирают в пипетку, а из пипетки спускают в
эбулиостат.
В зависимости от массовой доли PB в
растворе и интенсивности его окраски применяют два варианта титрования: для
светлых растворов, содержащих 0,13...0,05% PB1
используют прямое титрование раствором сахара; для темных растворов или
растворов, содержащих меньше 0,05% PB1
применяют дотитровывание раствором глюкозы.
Методика анализа по первому варианту. В колбу прибора
наливают воду и ставят прибор на электрическую плитку. Для равномерного
образования пара на дно колбы помещают кусочки пористого стекла или шамота. Когда
вода закипит, вынимают из колбы эбулиостат и наливают в него из дозаторов
сначала 5 см3 раствора А, а затем 5 см3 раствора Б. Осторожно
перемешивают растворы в эбулиостате и медленно вставляют эбулиостат вместе с
пробкой в колбу.
Затем верхнее отверстие эбулиостата закрывают пробкой с бюреткой,
в которую наливают исследуемый раствор сахара. Регулируют выход пара через
отводную трубку таким образом, чтобы жидкость в эбулиостате нагрелась до
температуры кипения воды примерно за 0,5 мин. Как только пар начнет проходить
через медно-щелочной раствор, начинают титрование раствором сахара.
Сначала проводят ориентировочное определение. Раствор сахара
из бюретки добавляют по каплям со скоростью одна капля за 1...2 с до перехода
окраски раствора из синей в желтую и замечают объем раствора сахара, израсходованного
на титрование. Затем проводят окончательное определение. В эбулиостат заливают
новую порцию медно-щелочного раствора, подготавливают эбулиостат к титрованию,
как указано выше, и начинают титрование. Вначале сразу прибавляют 80...90%
объема раствора сахара, израсходованного при ориентировочном определении, и
через 2 мин с начала пробулькивания пара через жидкость в эбулиостате
дотитровывают, прибавляя раствор сахара со скоростью одна капля за 6...7 с, до
перехода синей окраски в желтую от одной капли сахарного раствора.
По бюретке определяют объем раствора сахара,
израсходованного на титрование 10 CMi медно-щелочного раствора.
Массовую долю PB1%, в
гидролизате легкогидролизуемых полисахаридов или в разбавленном
нейтрализованном гидролизате трудногидролизуемых полисахаридов г, и ст
соответственно рассчитывают по формуле
 1
где T1 - титр
медно-щелочного раствора по глюкозе для первого варианта, мг; х
- объем гидролизата, израсходованный на титрование 10 см1
медно-щелочного раствора.
Методика анализа по второму варианту. Подготавливают прибор
к работе, как и в первом варианте, но в эбулиостат кроме 5 см1
раствора А и 5 см3 раствора Б, добавляют, отмеривая пипеткой,
определенный объем раствора сахара. В случае темного раствора, содержащего
более 0,05% PB, этот объем должен составлять 1...2 см3,
а в случае раствора с массовой долей PB менее 0,05% - 5
см3. Затем к жидкости в эбулиостате добавляют из бюретки такой объем
раствора глюкозы концентрацией около 0,1 г/100 см3, чтобы на
дотитровывание после 2 мин кипячения потребовалось бы не более 1 см3
этого раствора. Добавляемый объем определяют предварительным анализом. Концентрация
добавляемого раствора глюкозы должна быть установлена точно; удобнее всего
пользоваться раствором глюкозы, приготовленным для установки титра
медно-щелочного раствора,
После перемешивания жидкости эбулиостат с пробкой медленно вставляют
в колбу, закрывают его пробкой с бюреткой, в которую налит раствор глюкозы. Через
2 мин с начала пробулькивания пара через жидкость в эбулиостате проводят
дотитровывание раствором глюкозы, добавляя его со скоростью одна капля за 6...7
с до перехода окраски в желтую от одной капли раствора глюкозы,
израсходованного на дотитровывание.
Массовую долю PB,%, в гидролизате
легкогидролизуемых полисахаридов или в разбавленном нейтрализованном
гидролизате трудногидролизуемых полисахаридов сл и сг
соответственно рассчитывает по формуле
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5 |
