Курсовая работа: Силикагель и его применение в высокоэффективной жидкостной хроматографии

-колонка размером 4,6х250 мм, заполненная силикагелем октасилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Waters Symmetry C8;

-колонка размером 4,6х250 мм, заполненная силикагелем октасилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Zorbax SB C8;

-колонка размером 4,6х250 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Zorbax SB C18;

-колонка размером 4,6х150 мм, заполненная циркония оксидом для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Discovery ZR-РBD;

-мерная колба вместимостью 25 мл;

-микропипетка автоматическая 100–250 мкл.

Реактивы:

-ацетонитрил для хроматографии CH3CN [19];

-вода для хроматографии [19];

-дикалия гидрофосфат K2HPO4 [19];

-кислота фосфорная концентрированная H3PO4 [19];

-субстанция эналаприла малеата C20H28N2O5·C4H4O4.

Методика [21]:

Испытуемый раствор. Близко 100 мг (точная навеска) субстанции эналаприла малеата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в 20 мл воды для хроматографии, доводят объем раствора водой для хроматографии до метки и перемешивают. 2,5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора подвижной фазой до метки и перемешивают. Срок годности раствора – 1 сутки.

Буферный раствор. 1,74 г. дикалия гидрофосфата растворяют в 800 мл воды, доводят рН до значения 2,0±0,1 [19] кислотой фосфорной, доводят объем водой для хроматографии до 1000,0 мл и перемешивают.

Хроматографируют 10 мкл раствора сравнения на жидкостном хроматографе с УФ-детектором при таких условиях:

-подвижная фаза – буферный раствор – ацетонитрил для хроматографии (75:25), дегазированная на ультразвуковом очистителе;

-скорость подвижной фазы 1,5 мл/мин;

-детектирование при длине волны 215 нм;

-температура колонки 60оС.

Хроматографическая система считается пригодной, если:

-число теоретических тарелок, рассчитанное по пику эналаприла, не менее 6000;

-коэффициент симметрии пика эналаприла не более 1,7.

2.5 Анализ полученных результатов

В ходе эксперимента для оценки удерживающей способности химически модифицированных силикагелей на примере вещества эналаприла малеата были использованы колонки на основе цианосилильного силикагеля (Waters RP-CN 4,6х250 мм, Zorbax XDB-CN 4,6х250 мм), а также колонки на основе октадецилсилильного (Waters Symmetry C18 4,6х250 мм, Zorbax SB C18 4,6х250 мм) и октасилильного (Waters Symmetry C8 4,6х250 мм, Zorbax SB C8 4,6х250 мм) силикагелей. Апробированные колонки имеют одинаковую геометрию (высоту и длину колонки, размер частиц сорбента), но различаются «привитыми» фазами. Также в конце эксперимента для оценки зависимости удерживающей способности от природы самого сорбента была апробирована колонка на основе оксида циркония (IV). Ввиду дороговизны колонок на основе оксида циркония (IV) использовалась колонка размером 4,6х150 мм (Discovery ZR-РBD 4,6х150 мм).

Полученные данные, приведенные в табл. 2, показывают существенные различия в удерживании эналаприла малеата в зависимости от «привитой фазы».

На силикагелях, модифицированных группами С18 и С8 времена удерживания эналаприла малеата достаточно велики для его полного разделения, однако эффективность колонок не соответствует поставленным требованиям (число теоретических тарелок - менее 6000, коэффициент симметрии пика - более 1,7).

Времена удерживания в цианосилильной колонке Waters RP-CN 4,6х250 мм, а также в колонке на основе оксида циркония (IV) Discovery ZR-RBD 4,6х150 мм малы и сопоставимы со временем выхода неудерживаемого компонента. Кроме того, эти колонки отличаются наименьшим числом теоретических тарелок, что указывает на низкую эффективность разделения.

Таким образом, для методики количественного определения эналаприла малеата оптимальной хроматографической колонкой, отвечающей поставленным требованиям (п. 2.4), при данных условиях хроматографирования является колонка размером 4,6х250 мм, заполненная силикагелем цианосилильным для хроматографии [19], с размером частиц 5 мкм Zorbax XDB-CN.

Таблица 2. Экспериментальные данные для вещества эналаприла малеата

Выводы

В курсовой работе рассмотрены важнейшие области применения силикагеля в промышленности, технике и науке, теоретическое обоснование зависимости адсорбционных свойств силикагеля от способа его получения и дальнейшей обработки, а также применение силикагелей в аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7